端粒酶活性

  端粒是真核生物染色体末端的一种特殊结构,由一富含鸟嘌呤的重复DNA序列及其相关蛋白组成。端粒是保护染色体末端稳定必不可少的结构。端粒长度的维持需要端粒酶活性的存在。永生细胞和肿瘤细胞能够长期生存,端粒酶起到了重要的作用。端粒酶是由RNA和蛋白体组成的复合体,属一种专一的依赖RNA的逆转录酶,能以自身的RNA为模板,从头合成染色体末端的端粒DNA,弥补细胞分裂时端粒DNA的丢失,维持端粒的长度,保持染色体的动态平衡,使细胞获得永生化。自1994年Kim建立了高敏感度的、以PCR为基础的检测端粒酶的方法以来,端粒酶引起了人们的广泛关注。人们发现,端粒酶与细胞的增生、分化和不死性有着极为密切的关系,已成为目前肿瘤和衰老基础研究的热点之一。

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基本信息 注意事项 指标结果解读 检查作用 检查过程
  • 检查部位: 血液血管
  • 科室:
  • 空腹检查:
  • 医院参考价: ¥30-¥140查看详细>>
  • 指标解读:
    正 常
    异 常

端粒酶活性注意事项

  近年来,“端粒、端粒酶假说”已被越来越多的研究所证实,以端粒酶活性水平为肿瘤诊断的生物标志和预后指标。

端粒酶活性指标解读结果

正常:

  阴性。

异常:
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端粒酶活性检查作用

端粒酶活性检查对多种癌症的诊断有参考价值。肝癌患者有较高的端粒酶阳性率,端粒酶活性阳性者AFP水平明显高于端粒酶活性阴性者。端粒酶有可能成为诊断肝癌的肿瘤标志物。端粒酶在大多数恶性肿瘤组织有较高水平表达,如神经母细胞瘤、乳腺癌、大肠癌、胃癌、前列腺癌、肺癌等。端粒酶活性与肿瘤的临床分期及预后密切相关。因此,端粒酶是目前最特异和具有普遍性的肿瘤标记物。

端粒酶活性检查过程

1反应周期:①变性:90℃ 30~60s;②引物和模板的退火温度:40~60℃ 30~60s;③延伸:72℃ 1~2min。

2经反复循环30~40次,最后1次72℃引物延伸7min后终止。除去液体石蜡后,产物可供分析。

3经琼脂糖凝胶电泳后,用溴乙锭染色,经紫外灯照射可见预料扩增长度的荧光条带。产物也可与放射标记或非放射标记的寡聚核苷酸探针行Southern印迹杂交或点渍印迹杂交。

4如用PCR自动仪则更为方便,将反应试剂、DNA模板及Taq-DNA聚合酶加入试管后,放进已调好程序,即所需变性→退火→延伸各自的温度和时间及循环次数的自动仪中进行反应,即可获得满意的扩增产物