芽生菌补体结合试验注意事项
该试验操作复杂,多被其他方法而取代。
芽生菌补体结合试验相关疾病
芽生菌补体结合试验检查作用
芽生菌补体结合试验对芽生菌感染的诊断有重要意义。阳性(滴度升高):芽生菌、球孢子菌、组织胞浆菌感染。
芽生菌补体结合试验检查过程
(1)补体和溶血素的滴定。 ①取补体1ml,加BBS 9ml,依次稀释成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同时取50%的溶血素 0.2ml,加BBS 9.8ml,即为1∶100的溶血素,然后继续稀释成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。 ②采取方阵排列试管,纵行各管加不同浓度的补体0.1ml,横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后,各管加BBS 0.2ml,补体和溶血素对照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml,摇匀,放37℃水箱中30min,观察结果。 以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。上表(表1)中溶血素1∶3200为一个溶血素单位,补体1∶80为一个补体单位。在实际应用时,溶血素用2u(3200÷2=1600),补体用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式试验: ①用V型微量反应板操作,每份标本作一个试验孔,一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。 ②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋转后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀释。 补体对照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊红细胞对照管:4。抗体对照管:0。阴性对照管;1∶2~1∶256=0。阳性对照管:同一份阳性血清,每次结果应一致