荧光标记A蛋白FITC-SPA检测法

  SPA 是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种主要成分,它能与多种正常哺乳动物的IgG的Fc片段结合,而不影响该抗体分子的免疫活性,仍能与抗原起反应,当用 荧光色素将其标记后,可制成特异的诊断制剂。在常规的荧光抗体技术间接染色法中,必须使用第二抗体(即抗球蛋白抗体),但由于动物的种类不同,需要使用抗 各种动物的第二抗体(如兔抗猪球蛋白抗体、兔抗马球蛋白抗体等)和抗各种动物球蛋白的荧光抗体,这样不仅操作复杂,同时也容易出现类属反应。而SPA能与 多种哺乳动物的IgG的Fc片段结合,因此可用SPA来取代第二抗体,这样就不受第一抗体动物种属来源的限制,同时,SPA荧光试剂制备简单,易于纯化和 高度稳定。用其检测病毒抗原时,将培养在飞片上的病毒感染细胞用PBS轻洗2次,然后用标记的SPA荧光试剂覆盖,置4℃10~30分钟,用PBS洗二次 后,将玻片反置于载玻片上,于荧光显微镜下观察结果。

...[详细][收起]
目录:
基本信息 注意事项 指标结果解读 检查作用 检查过程
  • 检查部位: 其他
  • 科室:
  • 空腹检查:
  • 指标解读:
    正 常
    异 常

荧光标记A蛋白FITC-SPA检测法注意事项

  在链球菌细胞壁上,亦发现有类似SPA免疫功能的蛋白成分存在,通常将A群链 球菌产生的称为Ⅱ型FcR,C群链球菌细胞壁产生的称为Ⅲ型FcR,G群链球菌产生的称为Ⅳ型FcR,兽疫链球菌产生的?Ⅴ型FcR,以上各型FcR均能 与人及动物IgG的Fc段结合,如将其引入到免疫检测系统中,也可充当第二抗体应用。

荧光标记A蛋白FITC-SPA检测法指标解读结果

正常值:
 1.蛋白质定量:测定荧光抗体的蛋白质mg/ml量。
 2.结合荧光素定量:先制作荧光素定量标准曲线,即准确称取FITC1mg,溶于10ml 0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液中,再用0.01mol/l pH7.2PBS稀释到100ml,此时荧光素含量为10 μg/ml,以此为原液,再倍比稀释9个不同浓度的溶液,用分光光度计在490nm波长测定光密度值(OD),以光密度为纵坐标,荧光素含量为横坐标,作标准函数图。
  荧光素与蛋白质结合后,其吸收光谱峰值向长波方向位移约5nm,FITC和蛋白质结合后由490nm变为493~495nm,RB200和蛋白质结合后变为595nm。

高于正常值:
暂无相关资料

低于正常值:
暂无相关资料

荧光标记A蛋白FITC-SPA检测法检查作用

常用于实验、临床特殊检查。

荧光标记A蛋白FITC-SPA检测法检查过程

1常规检测HLA抗原的方法为Terasaki 和McClelland提出的微量细胞毒实验. 单克隆抗体和荧光素的开发使得流式细胞仪在各个领域得到空前的发展,多参数同时测定使得流式细胞术得以快速,灵敏,2特异地检测某一特定细胞群中某一特异性抗原的表达。与传统方法相比,用流式细胞仪来检测HLA-B27的表达,灵敏度可达100%,3特异性达97.4%,阴性结果强直性脊柱炎的排除率为99.9%;结果稳定,样本之间,不同仪器之间,不同实验室之间可重复性高。测定值高于参比值者为阳性,反之为阴性。