血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验注意事项
1、血片制成后,在2h内染色,否则可出现假阳性反应。要求涂片薄,细胞平铺分散。
2、缓冲液的pH、温度、洗脱时间应严格控制,否则影响测定结果。
3、也可用稀释瑞氏染色液作对比染色。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验指标解读结果
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验检查作用
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验对地中海贫血的诊断及分型有作用。(1) 多数红细胞染成红色:β-地中海贫血重症型。 (2) 少数红细胞染成红色:β-地中海贫血轻症型、再生障碍性贫血、溶血性贫血。 (3) 染色深:遗传性HbF增多症纯合子型。 (4) 染色浅:遗传性HbF增多症杂合子型。 (5) 染色深浅不均匀:β-地中海贫血轻症型。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验检查过程
(1)沉淀法:与抗Sm、抗RNP或抗SS-B等类似的检测方法不同,小牛、兔、胸腺提取物由于没有足够浓度的Ro抗原,不能用于免疫双扩散和反相免疫电泳,而主要从人脾组织或人培养细胞(WI-L2)获得。沉淀带与参考血清相同,核实为SS-A特异性。
(2)免疫印迹法:抗原采用细胞培养物如HeLa、MolT-4。当与参考血清有两条相同典型带(60×103和52×102)时,可确证为抗SSA(Ro)阳性。
(3)ELISA:可用亲和纯化或重组52×103和60×103蛋白,或相对纯化的hY-RNP颗粒作抗原