α-羟丁酸脱氢酶

　　(1)比色法：

　　①Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法，以国际单位(U/L)计算。上述方法是37℃比色法，为使各方法间结果有更好的可比性，可转换成30℃连续监测法的相应单位。37℃转换成30℃温度系数为0.87。

　　②因红细胞内该酶活性高，应在2h内及时分离血清，标本不能溶血。4℃酶活性稳定不少于7天。

　　③可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆，草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。

　　(2)连续监测法：

　　①此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐，其最适底物浓度为15mmol/L(25℃)，反应混合物的最终浓度：磷酸盐65.4mmol/L、NADH 0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L，样品容积组分比0.023。改为37℃测定结果与LDH相关性较好。

　　②α-酮丁酸钠较稳定，α-酮丁酸长期存放，其缩合物可抑制酶促反应。

　　③国内商品试剂盒的方法，一般是在操作前将α-酮丁酸与NADH溶液混合，置反应温度条件下数分钟后，作为单一试剂取出一定量加入样品中，延迟时间30s后，监测3min。

对诊断心肌疾病和肝病有一定意义。(1)升高：1、急性心肌梗死、恶性贫血、溶血性贫血、畸胎瘤(LDH/α-HBDH比例增加)。2、白血病、恶性淋巴瘤、传染性单核细胞增多症(LDH/α-HBDH比例不增加)。(2)降低：免疫抑制剂、抗癌剂(LDA也降低)，遗传性变异的LDH-H亚型欠缺症(LDH/α-HBDH比值下降)。

1.比色法：按表1进行操作。　　　　混匀，在10～30min内，以490nm波长，光径1cm，蒸馏水调零比色，以AU-AC之差值，查标准曲线得酶活力单位。　　

2.连续监测法：　　①取血清0.05ml，加入NADH溶液2ml，37℃水浴10～15min，使NADH非特异性氧化完成。　　②加入预温至37℃的α-酮丁酸0.1ml充分混合，立即倒入37℃恒温比色杯内监测。

340nm波长，1cm光径，空气调零。　　③如△A/min>0.08，用磷酸盐缓冲液稀释血清5或10倍后重测。