钙是人体内含量最多的阳离子。原子式为Ca,原子量为40.08。正常成人含钙25~30mol,其中99%以上存在于骨骼及牙齿,骨骼是体内最大的储钙库,细胞外液含钙只有27mmol左右,含量虽少但在维持正常的神经肌肉应激性,腺体分泌以及一些酶系统的活性特别是在血凝过程中起着重要作用。细胞内液几乎不含钙。
血液中的钙绝大部分存在于血浆中,血浆钙有非扩散性钙及扩散性钙两部分。非扩散性钙与蛋白质结合(大约1g蛋白质结合0.87mg的钙),约占血浆总钙的40%~50%,扩散性钙主要为离子钙(Ca2+),还有小部分的钙盐(如柠檬酸钙,其他有机酸钙盐及碳酸氢钙等)。非扩散性钙与扩散性钙之间受H+浓度和HCO3-浓度的影响,在生理状态下保持平衡,可用下式表示。
血清钙注意事项
(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):
①MTB与EDTA有相似的氨羧结构,能螯合多种阳离子,但络合稳定常数不同。
②加入:EDTA的作用,目的在于掩蔽试剂中污染的钙以及其他的金属离子。能降低空白管吸光度,提高测定管吸光度,从而使方法灵敏度提高。
③EDTA的用量选择,绝大部分金属离子与EDTA的络合稳定常数大于钙,小于钙的仅是少数微量元素。限量的EDTA仅能掩蔽试剂中的干扰元素,没有多余的EDTA络合血清钙,一般加入配试剂中的浓度EDTA99~108μmol/L,最终络合显色反应的EDTA浓度50~54μmol/L。
④所用的试管清洗后用去离子水浸泡两次,再烤干备用。清洁管加入试剂后应显一致的浅灰绿色,若显蓝色则试管表示有钙污染。
(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:
①本测定用血清或肝素抗凝血浆标本。不能用钙螯合剂(EDTA-Na2)及草酸盐作抗凝剂的标本。
②邻甲酚酞是一种酸碱指示剂,在结构上与甲基百里香酚蓝相似,在中性或酸性环境中无色,仅在碱性溶液中和钙离子络合呈紫红色。所以pH对显色有很大的影响,在pH10.5~12时,此反应敏感性最好,故用pH11为宜。
③试剂中加入8-羟基喹啉消除镁的干扰,能特异地络合镁,TritonX-100具有消化蛋白的影响。有的作者,在试剂中还加入氰化物掩蔽其他金属离子;二甲亚砜消除蛋白影响及抑制邻甲酚酞络合物的解离,从而降低空白液的吸光度;聚乙烯吡咯烷酮亦能消除蛋白质、胆红质及磷的干扰。
④用来作血清钙测定的碱性缓冲液较多,可根据条件选用,常用的有乙二胺-氰化钾、乙二胺-醋酸钾-盐酸、乙二胺-乙二醇、乙醇胺-硼酸、2-氨基-2-甲基-1-丙醇等。用乙二胺-乙二醇缓冲液测定呈色稳定。乙醇胺-硼酸缓冲容量较大,并能使空白试剂的吸光度保持较低读数。2-氨基-2-甲基-1-丙醇无毒,无刺激性,也能使空白管有较低的读数。
⑤显色剂有时略有结晶析出,是8-羟基喹啉在水中溶解度很低,易析出结晶所致,这时可取上清液应用。
(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法
①测定标本若有黄疸或溶血时,终点不易观察,则必须将标本进行处理,首先用草酸盐将钙沉淀,再用盐酸及柠檬酸钠重溶。
A.尚需增加几种试剂:0.7mol/L草酸铵;0.05mol/L柠檬酸钠;1mol/L盐酸。
B.按下法操作:吸取血清0.1ml,置于离心管中,加去离子水0.25ml、0.7mol/L草酸铵0.05ml,混匀。置56℃水浴中15min。离心沉淀2000转/分10min。小心倾去上清液,并将离心管倒立于滤纸上吸干。加1mol/L盐酸及0.05mol/L柠檬酸钠各0.1ml于离心管中,溶解沉淀。按直接滴定法进行滴定及计算。
②钙指示剂种类繁多,名称较乱,不同指示剂所显滴定终点不同,受其他离子干扰的作用也不一样,钙红指示剂终点明显,且较少受镁离子等干扰。但本身不稳定。要经常新鲜配置,加入标本内后要立即用EDTA-Na2滴定。所用钙红为钙-羧酸钠,应与乙二醛缩双邻氨基酚的别名“钙红”相区别。
(4)离子钙测定:
①测定离子钙最好用血清。优点不参入抗凝剂,减少蛋白对电极的污染。肝素抗凝全血亦可用于离子钙测定,尤其急需要结果减少了凝血时间和离心分离血清的时间。但过量的肝素(30u/ml)能使离子钙浓度降低3%~5%。
②pH改变对Ca2+影响较大。pH降低能使Ca2+增加,反之能使钙离子减少,故采到的血标本尽可能防止CO2逸出,避免pH增加。
③标本应尽快测定,最好在采样后1h内完成。全血密封贮存于4℃冰箱可稳定6h或更长些时间。密封在注射器中的血清,若无气泡存在,室温可保存1~2h,4℃可保存24h以上。
④离子钙含量还与下列因素有关:
A.站立能使离子钙增高约1%~2%。
B.延长静脉淤血的时间能使离子钙增加2%,淤血时前臂运动几分钟离子钙可增加8%。
C.卧床3~12天足以使离子钙超出正常范围。
血清钙指标解读结果
- 正常值:
-
(1)甲基百里香酚蓝比色法(MTB):
①血清钙:成人2.03~2.54mmol/L
儿童2.25~2.67mmol/L
②血清离子钙:1.13~1.35mmol/L
③红细胞钙:全血中的钙几乎都在血浆中,红细胞中只有15.72μmol/L压积细胞。
④尿钙排泄量:随饮食不同而有较大幅度的变化:
A.低钙饮食时<3.75mmol/24h;
B.一般钙饮食时<6.25mmol/24h;
C.高钙饮食时可达<10mmol/24h。
⑤唾液钙:0.74~1.69mmol/L。
(2)邻甲酚酞络合酮直接比色法:见(MTB)法。
(3)乙二胺四乙酸二钠滴定法:见(MTB)法。
(4)离子钙测定:血清离子钙 成人为1.10~1.34mmol/L。
高于正常值:
A.甲状腺功能亢进症:有原发性和继发性两种。继发于佝偻病、软骨病和慢性肾功能衰竭。血钙增高大于2.6mmol/L,最高可达4.5mmol/L,同时血磷降低,小于1.13mmol/L,最低可达0.64mmol/L。尿钙增高,男性大于9.68mmol/24h,女性大于8.07mmol/24h。
B.维生素D过多症:血清钙、磷均可增多,钙质沉积于肾脏可发展成肾脏钙化病。
C.多发性骨髓瘤血钙增高:常因球蛋白增高,同钙结合增高。
D.肿瘤广泛骨转移:血钙中度增多,但磷正常或略高,尿钙排泄增多,尿中羟脯氨酸排泄增多,反映骨质胶原的分解。
E.阿狄森病。
F.结节病:由于肠道过量吸收钙,而使血钙增高,血磷略高。
低于正常值:
A.甲状旁腺功能减退:甲状腺手术摘除时以及甲状旁腺而引起功能减退,血清钙可下降到1.25~1.50mmol/L,血清磷可增高到1.62~2.42mmol/L,假性甲状旁腺功能减退并非缺乏甲状旁腺激素,而肾脏中缺乏对甲状旁腺激素起反应的腺苷酸环化酶,故引起血清钙降低。
B.慢性肾炎尿毒症:肾小管中维生素D33-1羟化酶不足,活性维生素D33不足,使血清总钙下降,由于血浆白蛋白蛋白减低使结合钙减低,但代谢性酸中毒而使离子钙增高,所以不易发生手足搐搦。
C.佝偻病与软骨病:体内缺乏维生素D,使钙吸收障碍,血清钙、磷均偏低。
D.吸收不良性低血钙:在严重乳糜泻时,因为饮食中的钙与不吸收的脂肪酸生成钙皂而排出。
E.大量输入柠檬酸盐抗凝血后:可引起低血钙的手足搐搦。
血清钙相关疾病
血清钙检查作用
血清钙检测可了解血清中钙离子浓度的情况。血钙减低可引起神经肌肉应激性增强而使手足搐搦。
血清钙检查过程
静脉取血