总甲状腺素

　　(1)本测定的灵敏度为5.1nmol/L，非特异性结合率(NSB)小于10%;测定范围为0～309nmol/L(0～240μg/L)。

　　(2)抗T4血清与一碘酪氨酸、二碘酪氨酸、三碘甲状腺原氨酸无交叉反应，因此本测定对T4特异。

　　(3)温育前必须充分摇匀以保证基体均匀，温育温度从20～36℃均可，若室温低于20℃应采用培养箱温育。

　　(4)离心前必须充分摇匀。

　　(5)试剂盒中所有试剂必须贮存在2～4℃。待测血清应在冰箱保存。若超过3天应分装成几小瓶，置-20℃保存，1个月内不影响测定结果。

　　(6)试剂盒的抗血清最高结合率在35%～65%均可使用，计算方法以标准管沉淀计数减去NSB管计数，除以总T计数减去仪器本底。

　　(7)实验室里可保存一些已知T4含量的血清或生物液体，在每次测定时作为质量控制。最好有低、中及高浓度者。

　　(8)其测定常受含碘饮食、药物以及TBG浓度的影响。

总甲状腺素是甲状腺功能状态基本的体外实验之一。糖皮质激素可使血中TSH和甲状腺结合球蛋白(TBG)水平下降，因此，各种原因所致的皮质醇增多症都可出现血清，TT4下降。TT4在甲亢时明显升高，T4型甲亢患者TT4浓度升高，而TT3浓度正常。甲减患者多明显降低;周围性甲减由于甲状腺激素受体或受体后的缺陷，致使外周组织对T4不敏感，T4代偿性分泌增多。亚急性甲状腺炎TT4水平可降低。血中甲状腺激素结合球蛋白(TBG)浓度是影响，TT4水平的重要因素。

本法分三个步骤，即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。

（1)抗原与抗体反应：将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内，置室温(15～30℃)作用24h，使其充分竞争结合。

(2)B、F分离：分离技术多种多样，常用沉淀法。①第二抗体沉淀法：又称双抗体法，在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体，使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉，一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀，分离完全，非特异性结合力低。但第二抗体用量较大，成本较高。此外血清浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法：使蛋白质处于等电点状态，水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速，缺点是非特异沉淀物较多，分离不完全。③第二抗体-聚乙二醇沉淀法：本法既有PEG法的快速沉淀优点，且保持第二抗体特异性沉淀的作用，又减少第二抗体用量，并降低PEG浓度，使非特异沉淀物减少。。

(3)放射性强度测定：B和F分离后，即可测定其放射性强度。测量仪器有两类：液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数，单位为cpm(脉冲数/min)。每次测定均需作一标准曲线图，以标准抗原的不同浓度为横坐标，以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F，亦可采用计算值B/BF、B/F或B/B0。标本应作双份测定，取其平均值，在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。