心电图检查：视室间隔缺损口径的大小和病期的早晚而异
小口径的缺损心电图可正常较大的缺损
初期阶段示左心室高血压
左心室肥大；随着肺血管阻力增加和肺动脉压力升高逐步出现左右心室合并肥大；最终主要是右心室肥大并可出现不全性束支传导阻滞和心肌劳损等表现
超声心动图检查：可发现室间隔缺损处回声中断和心室心房和肺动脉主干扩大情况高位较大缺损合并主动脉瓣关闭不全者可见舒张期瓣膜脱垂情况彩色多普勒检查可见经缺损处血液分流情况和并发主动脉瓣脱垂者舒张期血液倒流情况超声检查尚有助于发现临床漏诊的并发畸形如左心室流出道狭窄动力导管未闭等近年来二维心动超声和彩色多普勒检查已成为诊断先天性心血管畸形的主要手段在很大程度上已可取代心导管检查和心血管造影
胸部X线检查：小口径缺损左向右分流量较少者常无明显的心肺和大血管影像改变或仅示肺动脉段较饱满或肺血管纹理增粗口径较大的缺损当肺血管阻力增加不著呈大量左至右分流者则示左心室和右心室扩大如左心室特别扩大提示可能为巨大高位缺损合并主动脉瓣关闭不全；肺动脉段膨隆肺门和肺内血管影增粗主动脉影相对较小晚期病例肺血管阻力明显增高肺动脉高压严重者心影反见变小主要示右心室增大或合并右心房扩大突出的表现是肺动脉段明显膨大肺门血管影亦扩大而肺野血管影接近正常或反较细小
右心导管检查：测定和对比右侧心腔的血氧含量如右心室较右心房高出1.0容积%说明心室水平有左至右分流；分流量较少的小口径缺损或缺损口径虽不算小但已有明显的肺动脉高压致使左向右分流量减少者右室/右房血氧差常不足1.0容积%疑有此种情况时应加作吸氢试验对比观察右侧心腔各处氢离子曲线出现的时间如右室较右房明显超前出现说明心室水平有左至右分流；严重肺动脉高压心室水平呈双向或反向分流者右室右房间已无血氧差可从同期测定的体动脉血氧饱和度不同程度的下降而加以验证测定右侧心腔（特别是连续测定肺动脉和右心室）压力若右室压力明显超出肺动脉压根据其压力曲线特征可瓣明其合并右心室流出道或/和肺动脉瓣狭窄的情况；一般按肺动脉压与体动脉压的比值判定肺动脉压升高的程度＜40%者为轻度40～70%者为中度＞70%者为重度根据肺动脉压力与心排血指数换算出肺血管阻力有助于手术时机的选择和手术适应证及禁忌证的判定测算肺循环与体循环血流量及二者的比值一般以＜1.3为低分流量1.3～2.0为中分流量＞2.0为高分流量
心血管造影：逆行性插管至主动脉根部加压注入造影剂可判断是否伴有主动脉瓣脱垂（关闭不全）；导管插入左心室作造影可判明室间隔缺损的部位口径以及是否合并左心室流出道狭窄等
