1.暗视野显微镜检查:在皮损处用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液见有活动的梅毒螺旋体
2.免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体
3.活体组织检查梅毒螺旋体如用银染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或荧光抗体染色可查见梅毒螺旋体呈黑褐色有螺旋结构位于真皮毛细血管周围
4.不加热血清反应素玻片试验(Unheated Serum Reagin USR)也是VDRL抗原的改良敏感性及特异性与VDRL相似