一
细菌学检查：
嗜血杆菌属革兰氏阴性杆菌
培养条件显示多形性特征易染性此菌无芽孢无运动
1．镜检：从软下疳开放性溃疡取材涂片标本染色杜克雷嗜血菌易检出未破溃病灶从脓肿或横痃中穿刺取其穿刺液涂片标本染色也易检出更为典型用美蓝染色或革兰氏染色等镜检用10×100倍油浸观察
2．培养检查：软下疳菌分离培养较为困难故在采取病变材料时应注意取软下疳溃疡边缘下贮留脓汁或穿刺横痃抽吸的脓汁作为检体或再用生理盐水充分洗涤溃疡底面后再用生理盐水湿棉签涂抹标本送化验室培养
国际上软下疳的标准培养基一种是GCHGS（Hammond gonococcal media）由淋球菌琼脂培养基加牛血红蛋白胎牛血清万古霉素及纤维素氨基酸等组成；另外一种是MHHb（Muller-Hinton琼脂由Muller-Hinton 琼脂马血万古霉素及其他培养成份组成）上述两种培养基可以同时应用以提高阳性率
菌落常于接种后24-48小时形成色灰黄而透亮直径约为1-2mm从菌落处取材作革兰染色阴性为成双的短杆菌成链状排列同时应作生化反应以鉴定之主要有：氧化酶试验弱阳性过氧化酶试验阴性非卟啉试验阴性硝酸盐还原试验阳性硷性磷酸酶试验阳性
杜克雷嗜血杆菌的培养不仅有助于诊断而且可确定分离的细菌对抗生素的敏感性目前已分离出耐抗生素的杜克雷嗜血杆菌
二血清学诊断软下疳
感染杆克雷嗜血杆菌能产生抗体通过血清学检查不论是补体结合凝集反应以及荧光抗体间接法等均可证实但尚未推广目前认为IgM抗体敏感性为74%IgG抗体敏感性为94%其特异性分别为84%和64%
三PCR检测杜克雷嗜血杆菌
