羊水细胞性染色质

  羊水细胞性染色质检查用以预测胎儿性别,以估计某些遗传性疾病的可能发生概率。

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目录:
基本信息 注意事项 指标结果解读 相关症状 检查作用 检查过程

羊水细胞性染色质注意事项

  (1)染色体检查须于妊娠16~20周时取羊水标本。穿刺术前要排空尿液,两手叉腰,轻轻转动腰腹部。然后仰卧,用B超探测定位,选择好穿刺点,在严格的无菌操作条件下进行穿刺。一般抽取羊水20ml左右,放入洁净灭菌的离心管内,立即送检。

  (2)这些先天性遗传病的染色体有增多、缺乏、易位、倒置等数量和结构的异常,常表现为一种综合征,如多发性畸形、生长迟缓和智力缺陷等,多数导致胎儿流产、早产或死产。

羊水细胞性染色质指标解读结果

正常:

  X染色质:>0.06为女性胎儿,

  0.05为男性胎儿

  Y染色质:>0.05为男性胎儿,

  0.04为女性胎儿

异常:
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羊水细胞性染色质相关症状

羊水细胞性染色质检查作用

羊水细胞性染色质检查可以用于预测胎儿性别,以及估计某些遗传性疾病的可能发生概率。

羊水细胞性染色质检查过程

取羊水过程:排空膀胱后取仰卧位。腹部消毒应以穿刺点为中心向外围扩大,半径不小于10㎝。铺无菌孔巾。穿刺点局部以0.5%利多卡因浸润麻醉。持7号无菌腰穿针垂直刺入。经腹壁及子宫壁两次阻力,进入羊膜腔时有组织抵抗突然消失的落空感。拔出针芯即有羊水流出,用注射器抽取羊水约20ml,按需要立即送检。随后拔除穿刺针,用棉球和纱布盖住针孔,加压5分钟后胶布固定。羊水细胞培养染色体检查过程:

(1)取孕期16~20周羊水15~30ml,1000r/ml离心10min。

(2)弃去多余上清液,留1ml羊水和沉淀细胞,轻轻打散成细胞悬液。

(3)移入25ml方形培养瓶中,加pH6.5~6.8(含青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml)的培养基3ml及小牛血清1ml,置37℃温箱中培养。

(4)培养7~10天后可见大量成纤维样或上皮样细胞集落。此时可调换新鲜培养液。

(5)待细胞集落扩大成片,并有许多透亮的圆形分裂细胞时,即可加入秋水仙素,使最终浓度为0.1~0.3μg/ml,置37℃温箱中再培养5~6h(上述过程均在无菌条件下进行)。收获标准:①以成纤维细胞为主要类型,成片细胞生长;②以10倍目镜和20倍物镜观察,生长的细胞克隆覆盖1个或1个以上完整视野;③见到10个以上透亮的圆形细胞和10个以上双圆形光亮的分裂细胞。

(6)如果细胞生长不旺盛,生长周期不齐或细胞老化,未达收获标准,可在原瓶继续传代培养。方法:在无菌条件下先倒去培养液,加入2.5g/L无菌胰蛋白酶液数滴,摇动后倒去。再加入胰蛋白酶5~10滴,在37℃下轻轻摇动约5min,使贴壁细胞脱落。加入含小牛血清的新鲜培养基4ml,在37℃静置培养4~5h。再小心更换培养液,继续培养,一般传代后3~5天即可收获。

(7)将培养液移至刻度离心管中,加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培养瓶内,置37℃温箱中5min,然后用弯头吸管冲洗贴壁细胞(也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化)。将脱离瓶壁的细胞倒入离心管中,与原培养液相混合,并用少量温热生理盐水冲洗培养瓶,洗下的细胞也一并倒入该离心管,以1000r/min离心10min。

(8)吸弃上清液,加入预温37℃的0.075mol/LKCl低渗液3~5ml,置37℃10~15min。

(9)预固定、固定及制片均与外周血细胞染色体标本的制备法相同。