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血清胰岛素原

  人胰岛素原(proinsulin)是岛素的前体物质,由胰岛素和C肽组成,具有双重免疫活性,既可与胰岛素抗体结合,又可与C肽抗体结合。胰岛素原由胰岛β细胞合成和分泌,主要在肾脏分解代谢。生理情况下,只有极少量的胰岛素原释放入血,在病理情况下,胰岛β细胞释放胰岛素原增多,血中胰岛素原水平升高。

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目录:
基本信息 注意事项 指标结果解读 相关疾病 检查作用 检查过程

血清胰岛素原注意事项

  (1)在操作过程中加量务必精确。

  (2)碘化钾、氯胺T及偏焦亚硫酸钠溶液在使用前几分钟配制。其他溶液可于-20℃贮存。

  (3)加入葡聚糖活性炭后,在4℃静置15min,不要延长时间或升高温度,否则会导致沉淀计数增加。

  (4)如市上有胰岛素放免试剂盒出售,可省略抗胰岛素抗血清制备,胰岛素标记等步骤,操作方法须严格按照试剂盒所附说明书进行。

血清胰岛素原指标解读结果

正常值:
放射免疫法:<0.2μg/L。

高于正常值:
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低于正常值:
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血清胰岛素原相关疾病

血清胰岛素原检查作用

(1) 糖尿病患者血浆胰岛素原水平明显升高。1型糖尿病由于胰岛胰岛素合成和分泌极度下降,刚合成的胰岛素原在未转变为胰岛素的情况下即释放入血,造成血浆胰岛素原升高。研究证明,部分表现为高胰岛素血症的2型糖尿病患者其实为高胰岛素原血症,是因为胰岛β细胞功能障碍,胰岛素原分泌增多所致。   (2) 胰岛β细胞瘤、家族性高胰岛素血症患者血浆胰岛素原水平明显升高。   (3) 慢性肾功能不全时,胰岛素原的分解代谢降低,可致血浆胰岛素原升高;甲亢时亦可出现血浆胰岛素原水平升高。

血清胰岛素原检查过程

本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。

(1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。

(2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体,使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉,一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。但第二抗体用量较大,成本较高。此外血清浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白质处于等电点状态,水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速,缺点是非特异沉淀物较多,分离不完全。③第二抗体-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀优点,且保持第二抗体特异性沉淀的作用,又减少第二抗体用量,并降低PEG浓度,使非特异沉淀物减少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性将小分子的游离部分吸附。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。在抗原与抗体反应后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游离抗原吸附在活性炭颗粒上,离心使颗粒沉淀,上清液中含有结合的标记抗原。

(3)放射性强度测定:B和F分离后,即可测定其放射性强度。测量仪器有两类:液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数,单位为cpm(脉冲数/min)。

每次测定均需作一标准曲线图,以标准抗原的不同浓度为横坐标,以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F,亦可采用计算值B/B+F、B/F或B/B0。标本应作双份测定,取其平均值,在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。

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