正铁血红蛋白(Hi)由多种氧化物均可将血红蛋白氧化成高铁(Fe3＋)血红蛋白，而失去带氧能力。高铁血红蛋白呈红褐色，有634、578、540和500nm四条吸光带。根据吸光度，可求得血红蛋白浓度。因此在临床上，可用诊断某些变性血红蛋白血症。
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HiCN是目前血红蛋白各种测定法中最准确的方法，除HbS、HbC外其他血红蛋白均可转化成HiCN，本文介绍试剂为国际血液学标准化委员会(ICSH)所推荐。由于HiCN的毫摩尔吸光系数得到国际公认，故可用经严格校准的高级分光光度计根据吸光系数直接计算。
表示540nm测得吸光度，251为血液稀释倍数，11.0为Hb分子单体毫摩尔吸光系数，1.0是光径，16114.5是单体分子量，除1000即由毫克(mg)换算为克(g)。
稀释液应贮存于棕色玻璃瓶中，不得贮存于塑料瓶中，否则氰离子吸附于塑料瓶壁，使测定结果偏低。
稀释液含氰化钾，切勿用口吸液。测定后废液应加入等量水稀释，并按每升加次氯酸钠溶液35ml，混匀，敞开容器，放置一夜后排入下水道。
血红蛋白测定尚有多种方法，目前所报道的方法均未建立本身的标准物，采用此类方法务请慎重，须以HiCN法为参考法进行评价后方可使用。尤须注意现在市售血红蛋白质控液均为HiCN法质控液，用于其他方法会有明显偏倚。
血浆正铁血红蛋白指标解读结果
血浆正铁血红蛋白检查作用
通过检测该血红蛋白的浓度可用诊断某些变性血红蛋白血症。生理性增加见于新生儿，高原居住等。病理性增加见于真性红细胞增多症，代偿性红细胞增多症。减少见于各种贫血、白血病、产后、失血后等。
血浆正铁血红蛋白检查过程
1.备齐用物，标本容器上贴好标签，核对无误后向患者解释以取得合作。露出患者手臂，选择静脉，于静脉穿刺部位上方约4～6cm处扎紧止血带，并嘱患者握紧拳头，使静脉充盈显露。
2.常规消毒皮肤，待干。
3.在穿刺部位下方，以左手拇指拉紧皮肤并固定静脉，右手持注射器，针头斜面向上与皮肤成15度～30度，在静脉上或旁侧刺入皮下，再沿静脉走向潜行刺入静脉，见回血后将针头略放平，稍前行固定不动，抽血至需要量时，放松止血带，嘱患者松拳，干棉签按压穿刺点，迅速拔出针头，并将患者前臂屈曲压迫片刻。
4.卸下针头，将血液沿管壁缓缓注入容器内，切勿将泡沫注入，以免溶血。容器内放有玻璃珠时应迅速摇动，以除去纤维蛋白原;如系抗凝试管，应在双手内旋转搓动，以防凝固;如系干燥试管，不应摇动;如系液体培养基，应使血液与培养液混匀，并在血液注入培养瓶前后，用火焰消毒瓶口，注意勿使瓶塞接触血液。
5.送实验室检查。
