辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法

(别名:PAP)

  PAP复合物的特点与该法试剂制备方法有关。首先用HRP去免疫动物,使其产生高效价、高特异性的抗HRP抗体,然后用HRP与之结合,因是离体制备的HRP抗HRP复合物,它的形成不同于其他抗原—抗体反应。在抗原稍过量时,所有的抗HRP抗体均参与形成可溶性PAP复合物,仅残留少许游离的HRP。而大多数抗原—抗体反应需要抗原绝对过量才能形成可溶性复合物。PAP复合物的形状相当稳定,不受抗原量的影响,无论最初加入的抗原、抗体过量与否,最终形成的PAP复合物其HRP/抗HRP之比绝大多数为3;2,应用离心沉降、液相扩散及电镜观察等方法,显示PAP复合物呈五角环状结构,3个角为HRP,另2个角为抗HRP抗体,分子质量为400~430kDa,此结构非常稳定。

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辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法指标解读结果

正常值:
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高于正常值:
高于正常值:
(1)抗体活性高 非标记抗体酶法最大限度地保存了抗体活性,这是因为在所有的反应过程中,任何抗体均未被酶连接,避免了标记过程中对抗体活性的损害。
(2)灵敏度高 实验证实,一般情况下PAP法比间接酶标法敏感20倍。这是因为形成PAP复合物时,过氧化物酶(HRP)已相当稳定,经洗涤不再发生丢失。

低于正常值:
低于正常值:背景染色低 PAP法中,连接抗体中即使存在非特异性抗体,因其不是抗IgG的特异性抗体,故不能与抗HRP抗体结合,即不能把PAP复合物连接在非特异性抗体上。

辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法相关疾病

辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法相关症状

辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法检查作用

辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法(PAP)是临床检验试剂中的常用酶,不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒,对疾病的诊断提供依据。

辣根过氧化物酶—抗辣根过氧化物酶法检查过程

1.备齐用物,标本容器上贴好标签,核对无误后向患者解释以取得合作。露出患者手臂,选择静脉,于静脉穿刺部位上方约4~6cm处扎紧止血带,并嘱患者握紧拳头,使静脉充盈显露。  

2.常规消毒皮肤,待干。  

3.在穿刺部位下方,以左手拇指拉紧皮肤并固定静脉,右手持注射器,针头斜面向上与皮肤成15度~30度,在静脉上或旁侧刺入皮下,再沿静脉走向潜行刺入静脉,见回血后将针头略放平,稍前行固定不动,抽血至需要量时,放松止血带,嘱患者松拳,干棉签按压穿刺点,迅速拔出针头,并将患者前臂屈曲压迫片刻。  

4.卸下针头,将血液沿管壁缓缓注入容器内,切勿将泡沫注入,以免溶血。容器内放有玻璃珠时应迅速摇动,以除去纤维蛋白原;如系抗凝试管,应在双手内旋转搓动,以防凝固;如系干燥试管,不应摇动;如系液体培养基,应使血液与培养液混匀,并在血液注入培养瓶前后,用火焰消毒瓶口,注意勿使瓶塞接触血液。  

5.送实验室检查