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胞内分枝杆菌感染

(细胞内分枝杆菌感染)

胞内分枝杆菌感染如何鉴别?

向您详细介绍胞内分枝杆菌感染应该如何鉴别诊断。

  1. DNA Probe:对于临床常见致病分枝杆菌,已有现成可以获得的DNA探针,包括结核分枝杆菌复合群、鸟、胞内、堪萨斯、戈登等分枝杆菌。探针

  经吖啶酯标记,结果经荧光光度计测定,实验周期仅2 h,方法简便易行。缺陷已如前述:不是所有分枝杆菌都有已知的特异探针,结核杆菌复合群的探针不能区

  分人型,牛型及BCG等。

  2. PCR-直接测序法:这种方法的基本过程是,先PCR扩增一模板DNA,然后对扩增片段进行测序。测序后或人工解读或使用数据分析软件自动解读。基

  于PCR的测序已成为分枝杆菌菌种鉴定的金标准,甚至有人将此技术用于直接检测标本中的分枝杆菌,尤其对于传统培养不能生长的菌种[14,15]。常用的靶基因有:16S-rRNA基因,是非常理想的基因分类靶基因有如下优点:①其分子结构具有高度保守的特性,只在某些位置有少量的核苷酸序列改变,而这些位置的改变有分枝杆菌属或种特异性。②许多分枝杆菌的16S-rRNA基因序列已测定完成。③长度适中,基因在细胞内有多拷贝。针对该基因两个高度可变区进行测序可以鉴定大部分分枝杆菌菌种,但不能区别结核杆菌复合群,堪萨斯与非致病性胃分枝杆菌在此两个区域序列相同,在区分海及溃疡分枝杆菌时需另外测定16S-rRNA基因的其他序列[16,17]。Kirschner等[16]于1993年就利用这一方法实现了对52种分枝杆菌的菌种鉴定。另外32-kDa蛋白[18],65-kDa热休克蛋白[19]和16S-23S rRNA区间序列包含足够的序列多样性,可以区分所有临床上重要的分枝杆菌,也可鉴别堪萨斯和胃分枝杆菌。

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